1. EBV RTA Ab
(1)我自己做會再試試Rosetta-gami2,不然就要換其他plasmid—我看我老公論文換plasmid後,表現量有差 (同時濁水溪丁先生也是這樣建議)。
(2)濁水溪丁先生來看過WB結果,說把ERQ320 plasmid拿回去純化試試看 (若不成功不用錢),已經將plasmid給他,約估花2-3禮拜。
(3)基龍米克斯也有蛋白質純化的服務,他們公司的post-doc可以幫忙試不同plasmid X 不同compentent=一個條件8000元,不成功(蛋白質產量未達到0.5mg/L)的話要2500元(試劑費)。
2.Zta Ab抗體純化
(1)proteinA/G純化—丁先生說通常是延長抗體保存期限,我們保存在-80度應該OK,不過丁先生也不敢一定保證。
(2)antigen column—可提高專一性,但若用(1)純化可得約10-20mg/20ml serum,但用(2)可得2mg/20 ml serum (應該還是會有些抗體掉了)
問過萍學姊,他建議我用NA/TS在做一次,因為他用的是EREV/Dox,本來就會大量表現ZTA,看是不是也是1:5000的稀釋條件是OK的。
PS 萍學姊說他們實驗室都沒有純化抗體,只有應reviewer的建議純化少許抗體作實驗。
3.NP460htert (是不是要先等FY決定題目)
現在實驗室剩
(1)DKSFM+Epi:在去年年底混和好,目前剩有回溫過的150ml+在冷房的200ml (7266元/1L,約等貨14-20天)
(2)KGM-2在20111025購買500ml全新未拆封—冰箱有20ml之前留下來的 (10000元/1L)
PS
(1)有看過宜津的DATA是建議2ng/ml TGF-B作實驗=Dr.曹做NP460_EBVakata的條件
(2)小夏當初TW05EREV—PEG濃縮病毒可以明顯提高感染率,但TGF-B只有一咪咪