新的實驗(11/7~11/13)和老闆交辦事項(有更新)

做每一步驟前請先問自己:有放輕鬆嗎?清楚現在在做什麼吧。做完後紙頭、小抄記得收集好放入本院高級的實驗記錄本中。再滿意、微笑地清理現場,然後鎮靜地離開…
FOR AB730-first set(三重複|丸英蓮)
星期四(11/6):每位主刀者請挑Luc48算一下一格well的細胞數,謝謝。待抽RNA/protein的細胞均勻打散後置入-80冰箱中(每人有20管—微微震撼ORZ)。
FOR AB730-second set(二重複|丸英)
星期五(11/7):各細胞maintain者種三個含2.5~3M細胞的十公分盤。
星期一(11/10):丸英請seed 6孔盤,記得培養在不含藥的tet-free medium中(0.5M/well,Luc那一組0.3M/well)。主要是因為RNeasy只能容許10M/column.
星期二(11/11):丸英六孔盤每個well都加dox。小蓮請收取11/7 seed 的十公分盤細胞,要算細胞數。請以6~10M為一管,每種收兩管,均勻打散後置入-80冰箱中。這是我們零點的對照組,未雨稠繆用的啦。
星期三(11/12):丸英取一盤6孔盤做wash-off步驟。今天來抽第一批的蛋白質—請小蓮、小嬿主刀,丸英協助(共有30管,二度震撼ORZ)。
星期四(11/13):收細胞,五格for RNA,一格for protein(每人有20管,三度震撼ORZ)。

重點整理
星期五(11/7):種十公分盤細胞三盤、下午上環安課。
星期一(11/10):種六孔盤細胞、下午聽所內演講。
星期二(11/11):六孔盤加dox、收零點的對照組、下午大瞇(丸嬿自由發揮、英蓮拍手)。
星期三(11/12):六孔盤做wash-off步驟、抽第一批的蛋白質。
星期四(11/13):收細胞,5-well for RNA,1-well for protein。Bio-Rad要來demo ChemoDoc儀器。ただいま!若ready請開始跑5~6片小膠:三組Luc/6個sample跑一片來比較。同理,三組ER跑一片,那片若能偵測p27更棒。三組KR跑一片,三組EV跑一片來測EAD,三組KR跑一片來測KbZIP。

個別叮嚀
小蓮:(1)發票抬頭是維護費或維修費均可。(2)HONE-1該補的圖包括flag-egfp, flag-er, p21, p27, rH2AX, actin若已okay,放假前請記得上傳至nas,謝謝。(3)對了那一份PI3K LYxxx/Rapa versus ER-senescence實驗的結果,可不可以也掃描上傳一下。應該就是這兩樣問題會問吧,怎麼還沒消息呢?好慢。
大家懷念AMO cake嗎?下週回來時會帶一份過來給比較勤奮的人品嚐。