Ingrid:DLR western blot analysis沒有測出Flag-bands; pFA-GAL4系列質體活性測試(1:5+EF1-RL為internal ctrl)實驗已完成,等OrionL發完脾氣後才可得到實驗結果;著手進行7個T366及T367(含WT)全長的expression與DLR assay.
Maruko:Flag-IP有初步結果,繼續微調其它調件;latency disruption籌劃中;全長的pLenti系列DLR操作完畢,等待機器修復中;slide上那個”pAN-Luc”要改為PANp-Luc或PAN-Luc(這是學他們做ChIP-chip的人們說的)PAN stands for polyadenylated nuclear 是本人10年前花了好幾個晚上想出的名子,請務必保留…(另外一個UCSF group想出的叫nut=nuclear transcript=T1.1,我覺得我的小孩名子叫起來比較好聽耶.嘿嘿嘿,老灰阿說起歷史就停不下來,sorry)
小嬿:(1) 多張slide空白處大於二分之一, 宜將內容放大.(2)promoter和transcription initiation site(箭頭處)要分清楚,尤其在解釋第一個實驗結果時,要將它們指出來,順便把三種status(Pol II stalls near the transcription start site, locates throughout the genes, and no Pol II)的分類帶出來.(3)最後作者是想做二個不互相抵觸的推論(A)Pol II pausing is for transcription repression(現象一,換成另一種mutantToll-rm9/10,那些在Toll-10b被抑制的基因就開始表現了,而它們原先Pol II pausing的狀態也都變成Pol II均勻分佈的狀態.現象二,snail是已知在Toll-10b中持續表現的一個repressor,作者發現接近60%被snail represses的基因也有Pol II stalling狀態)(B)Pol II pausing prepares genes for later expression (e.g. rapidly induction for hsp70, next-stage developmental genes including heart and muscle in the Toll-10b etc).(4)萬一這學期分數沒有上次高,都是我的錯,選了一篇太艱深的paper了…(先行懺悔去)
(延伸閱讀) Poised RNA Polymerase II Gives Pause for Thought (多麼富有哲理的題目啊 Cell Minireview in May-2008) (待續)