ingrid

Primary NP cell from CELPROGEN

由 ingrid 在 四, 05/22/2014 – 15:53 發表 EBV and KSHV Cell Lines EBV infection Ingrid 瑞柏代理 網頁 http://www.celprogen.com/index.php?route=product/product&filter_name=nasophary&product_id=2028&path=26_44_45_47  Celprogen原廠配合的廠商為World Courier。 原廠並無販售coating matrix,所以可能還是建議需要購買它們家的耗材。

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20140212 Lab meeting – ingrid

LabMeeting-Ingrid由 EVKVLIN 在 三, 02/12/2014 – 00:00 發表 LIN Lab 2016 Ingrid LabMeeting YCK LabMeeting-Ingrid 由 EVKVLIN 在 三, 02/12/2014 – 00:00 發表  LIN Lab 2016   Ingrid   LabMeeting   YCK 2008/09/09 Lab Meeting 心得彙整 Ingrid: (1) Preparation of GST-KR for polyclonal antibodies: protocol okay, 但把benzonase加入resuspending buffer中,而protease inhibitor放在第一次thaw完的lysate中,如果還是很黏的話要在thaw完後sonicate 15~30秒 (2)  366/367EE 有抑制現象!請再repeat一次,並且加入pFA-系列,如果也是抑制:(A) 以IP確認WT,366AA及366EE和HDAC1之interaction(we’ve bought this ab, didn’t

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20131112 journal club paper

Dear all 這篇是我要在下星期二與大家分享的論文,請查收,謝謝! 會後補充:Bmi1會增加telomerase activity,是藉由增加hTERT promoter表現的調控,但是與在hTERT promoter上的c-myc binding sequences無關。 引用於這篇 與這篇 。                                                                                                                                            ingrid

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20130828 Lab meeting_Ingrid

(一) Lessons learned from next-generation sequencing in head and neck cancer. Head Neck. 2013 Mar;35(3):454-63. 主要是利用NGS技術分析頭頸部癌症臨床檢體,發現突變頻率比較高的基因依序為TP53、NOTCH1、HRAS、PIK3CA、CDKN2A。 (二) HPV與頭頸部癌症的關聯 1. HPV陽性感染的頭頸部癌症病人預後比較好。 2. HPV陽性感染的頭頸部癌症病人的基因突變率比陰性的還要少。 3. HPV陽性感染的頭頸部癌症的腫瘤基因表現比較近似其他種.HPV陽性感染癌症,HPV陰性感染的頭頸部癌症的腫瘤基因表現比較近似肺部鱗狀上皮細胞癌。 4. 頭頸部癌症有多種病毒感染,主要是HPV-16,其他包括HPV(18、92、10、26、53、32、6b)、Herpes virus(HSV-1)、HepB virus與polyoma virus。

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08/15 Ingrid報告

分析akata EGFP-EBV感染NP460hTert之後會發生什麼事 :1.調整很多條件使感染率提高。2.Rta及下游基因,以及Zta RNA皆在病毒感染後的細胞有偵測到。3.但是用WB及IFA仍無法偵測到病毒蛋白質的表現,目前仍在確認中。

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5/2 Lab Meeting-ingrid

1.製備以下表現質體以供濁水溪公司代製兔子多株抗體 (1) pGEXHis_cZ :已分裝保存於-80℃冰箱。可用於WB(1:2000)(萍)、IFA(1:2000)(鏸)及免疫組織染色 (1:1000)(鏸)。(2) pGEXHis_ER_Q320stop and pGEXHis_ER_L550stop : Q320stop已送給濁水溪代製。另外構築pGEXHis_ER_277E-516V做蛋白質表達。(3) pGEXHis_KR_E600stop and pGEXHis_KR_Q658stop :蛋白質表現量太少(失敗)。(4) pGEXHis_BALF3 :蛋白質表現量太少(失敗)。 2.使用EGFP當目標基因來測試建立NP460TetR_ER inducible cell lines的條件:用未稀釋的lentivirus病毒液直接感染6小時後移除,細胞發綠光比例接近100%,之後細胞放大後,使用10 ug/ml zeocin作篩選16天,發現未加Dox與有加Dox的綠光比例類似,建議做WB(flag)作確認。 3.萍使用Mini-PROTEAN II multiscreen apparatus (Bio-rad)來進行抗體最佳稀釋倍數的實驗。相關資料在https://www.bio-rad.com/prd/en/US/LSR/PDP/f9ec3085-b590-44c6-9b36-b36876cad466/Mini-PROTEAN_II_Multiscreen_Apparatus 首先置備只有一個well的膠體,樣品量為單一well*20=200ug (萍通常使用量),轉漬完的NC膜置於裝置內,略將裝置傾斜後,從下面的孔注入600ul抗體稀釋液(避免氣泡),室溫靜置2小時後,以Tip移除抗體稀釋液,用TBST清洗3次後,將裝置打開把NC膜拿出,進行後續二抗的雜交實驗。

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