March 2012

03/28 Lab Meeting- 小夏

目前的工作: To determine the DDR1 mutations in 7 OSCC cell lines. Note:The external gene-specific primers and internal M13-appended PCR primers for activation loops and JM domain (Ref.1)(Ref.2) 這兩篇的mutation都與drug的sensitivity有關。 我稍微追了一下Ref.2: Cancer Cell 2005這篇以High-throughput DNA resequencing 在164 polycythemia vera病人當中的121位有 JAK2V617F missense mutation,其中41位homozygous mutation; 80位 heterozygous mutation。Homozygous mutations來自於mutation allele的duplication。這篇的貢獻在於Inhibition of the JAK2V617F kinase with a small molecule inhibitor

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未來的實驗計畫

1. EBV RTA Ab(1)我自己做會再試試Rosetta-gami2,不然就要換其他plasmid—我看我老公論文換plasmid後,表現量有差 (同時濁水溪丁先生也是這樣建議)。(2)濁水溪丁先生來看過WB結果,說把ERQ320 plasmid拿回去純化試試看 (若不成功不用錢),已經將plasmid給他,約估花2-3禮拜。 (3)基龍米克斯也有蛋白質純化的服務,他們公司的post-doc可以幫忙試不同plasmid X 不同compentent=一個條件8000元,不成功(蛋白質產量未達到0.5mg/L)的話要2500元(試劑費)。 2.Zta Ab抗體純化(1)proteinA/G純化—丁先生說通常是延長抗體保存期限,我們保存在-80度應該OK,不過丁先生也不敢一定保證。(2)antigen column—可提高專一性,但若用(1)純化可得約10-20mg/20ml serum,但用(2)可得2mg/20 ml serum (應該還是會有些抗體掉了) 問過萍學姊,他建議我用NA/TS在做一次,因為他用的是EREV/Dox,本來就會大量表現ZTA,看是不是也是1:5000的稀釋條件是OK的。 PS 萍學姊說他們實驗室都沒有純化抗體,只有應reviewer的建議純化少許抗體作實驗。 3.NP460htert (是不是要先等FY決定題目)現在實驗室剩(1)DKSFM+Epi:在去年年底混和好,目前剩有回溫過的150ml+在冷房的200ml (7266元/1L,約等貨14-20天)(2)KGM-2在20111025購買500ml全新未拆封—冰箱有20ml之前留下來的 (10000元/1L) PS(1)有看過宜津的DATA是建議2ng/ml TGF-B作實驗=Dr.曹做NP460_EBVakata的條件(2)小夏當初TW05EREV—PEG濃縮病毒可以明顯提高感染率,但TGF-B只有一咪咪

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自我介紹-Ya-Wen

我好像是外星人不太會使用Blog~ Anyway, 我的代號是Ya-Wen Chen就是我的英文名字啦, 很抱歉我沒啥special English name. 因為連外國人都可清楚叫Ya-Wen, 祝大家有個愉快的周末假期~

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哈囉~ 我是小莫,小莫就是Mogi,Mogi就是冠琦… 大~~~~~~家~~~~~~好~~~~~~~

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我是大頭 插花在一堆小字輩的中間 哈哈 BTW 黃憲達要來演講耶!!  1.  Time :  13:30 ~ 15:00 (Tue) 20 March 2012  Topic:  MicroRNA Resources for Biomedical Science : Databases  and Tools  Speaker:  Hsien-Da Huang (黃憲達), PhD

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