12/7 Lab Meeting- 小夏

1. 計數TW05TetER dox treat 1, 2, 3, 4天的細胞數(mix well, to count 3 times)及WST-1 activity沒有差異。建議一樣的條件只做LD與ED組別計數3天後的細胞數及測量WST-1 activity。2. TW05TetER “escapee” 的實驗,設計失敗。3. Flag抗體建議以Cell Signalling抗體來降低背景值,Rta的訊號(或雜band)用467抗體來證實。4.在TW05TetER,dox移除後,ER會隨著時間degrate,其程度與Luc相同,24小時已degrate超過一半; 若dox一直存在下,在96小時前ER的表現也都還會在。至於ER隨著時間增加而增加減少或者是持平,將會繼續釐清,將ER的Kinetics確定清楚。5. TW05EREV的9株clones以Q-PCR來看viral partical的產生,#1, #4. #7有少量particle,#2, 3, 5, 6, 8, 9則沒有偵測到particle的產生。以WB來看#1, #4. #7 lytic protein的表現Zta: 7>1>4, gp350/220: 1, 7 >4; 隨著dox的induction, #1, #4, #7 的cellular protein p63皆下降,p53皆上升。

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