2009

新的挑戰—for YCK (更新)

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真是不好意思,我又改變順序了1. 回溶HeLaTet (#3、#4)及HONE1Tet2. 測試Bsd在TW03、CGHNK2及Zeo對HeLaTet、HONE1Tet的耐受性3. 293FT用來包pLentiTR6, pLentiFlag-gZ, -cZ及GFP (每種包3個well, 就是半盤6-well plate之意).同時,可否問一下進階業務,”LONZA”有款叫KGM的medium,專門用來養keratinocyte,是否有進一部資料可供參考! 謝謝. ———————————————————-on 12/2/2009 Crazy SFL wrote:哈哈哈, 新年新氣象,這是給YCK和YLC的小禮物。先把手邊的東西忙完後,請著手下面有趣的實驗: Try to establish TW03-TetR, CGHNK2-TetR, CGHNC8-TetR and TW2.6-TetR。 Try to establish Luc, ER and gZ (B95-8 strain) in HONE1Tet, NP460Tet, TW03Tet, CGHNK2Tet, CGHNC8Tet and TW2.6Tet。這裡有個重點就是請再重讀一下原instruction manual, 把induction量弄到和293TetER相可匹配的程度。我們需要步步為營。

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『佛頂尊勝陀羅尼經』

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有關焰口本 （西域尊者往東來,卻被文殊化引開,東土若無尊勝咒,孤魂難以脫塵埃）Link is here. 感人的故事二則。 [尊勝咒緣起]：三十三天善法堂的善住天子，有一天忽然聽到空中傳聲告訴他，七日福報享盡會墜入畜生道、常吃穢物不淨的食物，之後再墮入地獄中備受諸苦，經多劫以後方為人，但雖得人身，而生來沒有雙眼，容貌醜陋，諸根不具，口氣常臭，缺乏衣食，連貧窮卑微的人都會嫌棄。善住天子聽了非常害怕與惶恐，趕緊告訴帝釋，帝釋以天眼觀看果然如此，但不知道原因，於是去見釋迦牟尼佛，求佛幫助。釋迦牟尼佛就告訴他們，善住天子有一世為孤苦婆羅門子，母親常出外求食。一日，因母親稍晚回來，便起瞋心罵母不如畜生，等到母親回來了，他就準備進食，忽 然看見空中有一出家眾騰空飛過，心中萬分敬仰，立刻合掌頭面作禮，邀請他降臨，以食物供養請求說法 ，他也因此而出家。 出家後被差作維那知事，卻因細故惡罵眾僧，所以這次供養出家眾得生天人的福報享盡，須墮入因罵母罵僧業所招的惡道。善住天子聽了十分難過，懺悔的嚎啕大哭起來，佛就安慰他，傳授他能滅一切業障，淨除三惡道苦的尊勝佛母咒，他依法持誦七日，自見一切罪報都滅了，天命增加無量，便歡喜地再去供養佛。尊勝佛母有三部經流傳於世，一部是極樂淨土長壽佛應觀世音菩薩所請而傳，另二部是釋迦牟尼佛應帝釋天及閻羅王之請分別傳授。事實上，尊勝佛母乃長壽佛為利益眾生而化現的，任何人只要向佛母祈禱或持念心咒，便不墮三惡道，能增長壽命究竟成佛。

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量化西方墨漬法

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以後實驗室quantitate protein band請依以下步驟進行: Plasmid 最好是一起抽的一批, 因實驗室LB/BHI已過使用期限,希望大家每次抽質體時盡量使用新鮮media及LB plate (1-cm厚度最佳),超過一個月以上的media及plate請自行定時清理(請不要當福壽螺到處蔓延留種,謝謝)。 若質體中有SV40-ori, 請以293T為host (DLR/expression etc),其餘它種質體則用293。 Transfection (24~48 h)每次請做p-100/1 ml-lysate的份量(6x p-35/1.2-ml), protein lysate量一次到位,不要老是重複在養細胞/TF效率好像有問題/plasmid不夠…(姑且稱之為小鼻子小眼睛的實驗) 檢測各質體間表現量:(i) 請以wild-type為標準 (所以wild-type可能要多transfect一份),293T為host的取5-ug及10-ug, 293為host的取25-ug及50-ug protein extracts run數片小膠,確定所使用的西方墨漬條件可分出一倍和兩倍間的差異。若是過強,那就請在砍primary/ secondary antibody濃度、incubation時間、ECL強度上三件事情上做調整。(ii)依前步驟所訂出的條件run一片小膠檢查各檢體間是否差異很大,如有二倍以上差異而各步驟又沒有太大疑慮,那表示可能有protein stability/proteosome involved,值得設計其他實驗來分析之.兩倍以下差異者微調input量可繼續往下的實驗。(Plasmid, 細胞用畢的請定時清理,不要當福壽螺到處蔓延留種,謝謝)。 附註定量software有三款,請在Lab Protocol中找到小抄。

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Novartis 石明石博士 Michael Shi 演講

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TKI 258 was a FGFR1 inhibitor, but the use of TKI 258 causes FGF23/bFGF increased. Melanoma trial found FGF mediated escape form anti-angiogenesis (sorxxxtinb/…) Early phase: VEGFR2 blockadge. Phase 3 trials: (a) FGFR3 expression/t94,14) trans-location in melanoma (b) FGFR3 mutations in bladder cancer (c) FGFR1 expression in breast cancer [這裡若有蒲教授的data就好了!!] AUY 922 is an inhibitor

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